新藥的開(kāi)發(fā)和利用,是生物技術(shù)的一個(gè)重要領(lǐng)域,藥物分析方法的探索,能更好地保證用藥的安全、有效,并為藥物生產(chǎn)提供可靠的指導(dǎo)性意見(jiàn)。三氯化鐵作為一種常用試劑,它能發(fā)生氧化還原反應(yīng)、配位反應(yīng),成鹽反應(yīng)等,部分生成物具有特征吸收光譜和色譜特征,經(jīng)實(shí)踐探索,利用上述性質(zhì)發(fā)現(xiàn)三氯化鐵在藥物分析中具有廣泛的應(yīng)用。

1、三氯化鐵的物理性狀和生化性質(zhì)

1. 1 三氯化鐵的物理性狀

? 三氯化鐵為黃棕色結(jié)晶或塊狀固體,無(wú)臭、有澀味,熔點(diǎn)555K,沸點(diǎn)588K,易溶于水,溶于乙酵、乙醚,在空氣中可潮解為紅棕色液體。

1. 2 三氯化鐵的生化性質(zhì)

(1) 因Fe3 + 水解而致其水溶液顯較強(qiáng)酸性,可使蛋白質(zhì)凝固。

(2) 三氯化鐵的六水合物能與β-球蛋白結(jié)合形成蛋白鐵,體內(nèi)容易吸收,可作營(yíng)養(yǎng)增補(bǔ)劑。成人男性致命量約6 克。

(3) Fe3 + 具有較強(qiáng)氧化性, Fe3 + + e = Fe2 + ,標(biāo)準(zhǔn)電極電位+ 0. 77lV。

(4) 三氧化鐵中Fe3 + 能與許多有機(jī)物形成有色配合物或鐵鹽,且易溶于水并形成有色溶液。

(5) 它對(duì)芳香族硝基化合物的還原反應(yīng)具有催化作用,也是合成縮醛、縮酮、二氯乙烷和一些酯化反應(yīng)的良好催化劑。(

6) 能生成鐵鹽沉淀和氯化物沉淀。

2、三氯化鐵在藥物分析中的特點(diǎn)

? 根據(jù)藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的內(nèi)容,藥物分析的任務(wù)包括藥品真?zhèn)舞b別、雜質(zhì)檢查和含量測(cè)定三個(gè)方面,可以利用物理或化學(xué)的方法進(jìn)行分析。利用三氯化鐵,藥物分析中可采用氧化還原反應(yīng)、配位反應(yīng)、沉淀反應(yīng),利用容量法、分光光度法、比色法等分析方法對(duì)藥物進(jìn)行分析,尤其是使用三氯化鐵利用分光光度法和比色法在藥物分析中的實(shí)用范圍廣,分析結(jié)果準(zhǔn)確。三氯化鐵在藥物分析中的應(yīng)用,為藥物分析方法拓寬了渠道,開(kāi)辟了新的分析路徑,并為結(jié)果的準(zhǔn)確性提供了有力的保證。

3、三氯化鐵在藥物分析中的應(yīng)用

3. 1 利用三氯化鐵與有機(jī)物形成有色配合物或鐵鹽

3. 1. 1三氯化鐵在藥物鑒別試驗(yàn)中的應(yīng)用。

(1) 由于苯酚和對(duì)乙酰氨基酚等酚類藥物分子結(jié)構(gòu)中含有酚羥基,可與三氯化鐵中Fe3 + 形成配合物,顯藍(lán)紫色,故借此進(jìn)行酚類藥物的鑒別實(shí)驗(yàn)。苯酚的鑒別方法是:取固體酚0. 1 克,加水10ml 溶解后,取5ml 加入1 滴三氯化鐵試液, 應(yīng)顯藍(lán)紫色。

(2) 甘露醇的鑒別試驗(yàn):取甘露醇飽和溶液1ml 加入三氯化鐵試液0. 5ml ,加入NaOH 試液0. 5ml ,即生成棕黃色的沉淀,振搖不消失,再滴加過(guò)量NaOH 試液,即溶解成棕色溶液。

(3) 水楊酸類藥物的鑒別試驗(yàn):該類藥物在中性或弱酸性環(huán)境下能與三氯化鐵

試液生成紫藍(lán)色配合物。鑒別方法是:取藥物水溶液加1 滴三氯化鐵試液,顯紫藍(lán)色即可。

(4) 四環(huán)素類藥物的鑒別:四環(huán)素類抗生素藥物與三氯化鐵生成有色配合物,可供鑒別,其中,鹽酸四環(huán)素的配合物顯紅棕色,鹽酸金霉素的配合物顯深褐色,鹽酸土

霉素的配合物顯橙褐色。

3. 1. 2三氯化鐵在藥物雜質(zhì)檢查中的應(yīng)用。

(1) 檢查鹽酸嗎啡中是否含有雜質(zhì)罌粟酸時(shí),加入三氯化鐵試液,不得生成紅色的罌粟酸鐵。

(2) 己內(nèi)酰胺在藥物中是一種有毒物質(zhì),它的檢查方法原理是:利用己內(nèi)酰胺和羥胺反應(yīng)生成異肟酸,再與三氯化鐵反應(yīng)生成紅棕色配合物,比色法和分光光度

法均可測(cè)定。

3. 1. 3三氯化鐵在藥物含量測(cè)定中的應(yīng)用

(1) 氨基酸中苯丙氨酸的含量測(cè)定,原理是:利用苯丙氨酸脫氨酶將苯丙氨酸氧化脫氨,生成產(chǎn)物苯丙酮酸與三氯化鐵反應(yīng)產(chǎn)生藍(lán)綠色化合物的溶液,溶液顏色的深淺與苯丙氨酸含量成正比,再利用比色法或分光光度法測(cè)定,制備的標(biāo)準(zhǔn)曲線有良好線性,因此測(cè)定樣品中的苯丙氨酸含量,能得到較準(zhǔn)確的結(jié)果。

(2) 葡萄糖酸δ內(nèi)酯的含量測(cè)定:用羥胺與其反應(yīng)生成異羥肟酸,異羥肟酸再與三氯化鐵反應(yīng)生成紅色絡(luò)合物,采用分光光度法測(cè)定,能得到較準(zhǔn)確的結(jié)果。利用三氯化鐵與物質(zhì)的顯色反應(yīng),采用分光光度法或比色法,還可以測(cè)定鹽酸環(huán)丙沙星和氯丙嗪的含量。

3. 2 利用三氯化鐵的氧化性在藥物分析中的應(yīng)用

? 主要在藥物鑒別試驗(yàn)中具有重要的應(yīng)用價(jià)值。

? 部分?jǐn)M腎上腺素藥含有酚的結(jié)構(gòu),首先與三氯化鐵配合顯色,在加入堿性溶液后,即可被Fe3 + 氧化而呈現(xiàn)紫色、紫紅色等其它顏色的變化,此特征可用作對(duì)腎上腺素、鹽酸去氧腎上腺素、重酒石酸去甲腎上腺素、鹽酸異丙腎上腺素進(jìn)行鑒別。方法是:取上述藥物的溶液,加入三氯化鐵試液配位顯色后,即可被Fe3 + 氧化而呈現(xiàn)紫色、紫紅色等其它顏色的變化,此特征可用作對(duì)腎上腺素、鹽酸去氧腎上腺素、重酒石酸去甲腎上腺素、鹽酸異丙腎上腺素進(jìn)行鑒別,方法是:取上述藥物的溶液,加入三氯化鐵配位顯色后,加入適量弱堿,觀察溶液顏色的變化進(jìn)行別。其中:腎上腺素加FeCl3試液后顯翠綠色,加入NH3·H2O 試液后氧化顯紫色到紫紅色,即可鑒別。重酒石酸去甲腎上腺素加入FeCl3 試液后顯翠綠色,加碳酸氫鈉試液,顯藍(lán)色到紅色的變化。鹽酸去氧腎上腺素加入Fecl3 試液顯紫色,加入堿性試液仍顯紫色。鹽酸異丙腎上腺素加入FeCl3 試液后呈深綠色,滴加新制的5 %NaHCO3 試液,顯藍(lán)色到紅色的變化。此方法可作為上述藥物可靠的鑒別依據(jù)。

3. 3 利用三氯化鐵與藥物生成鐵鹽沉淀進(jìn)行藥物鑒別

? 一些有機(jī)酸與三氯化鐵試液作用可生成鐵鹽,部分鐵鹽難溶于水,且具有特殊顏色。此特征可用作對(duì)藥物進(jìn)行鑒別試驗(yàn)。如利用三氯化鐵對(duì)苯甲酸進(jìn)行鑒別,控制苯甲酸溶液為堿性或中性,加入三氯化鐵試液生成堿式苯甲酸鐵鹽的赭色沉淀。方法是:取藥物苯甲酸樣品0. 2 克,加0. 4 %NaOH 溶液15ml 。振搖,過(guò)濾,濾液中加入三氯化鐵試液2 滴。即生成赭色沉淀。鑒別反應(yīng)靈敏。

3. 4 其它應(yīng)用以三氯化鐵為媒介物質(zhì),檢測(cè)其它物質(zhì)的反應(yīng)產(chǎn)物,進(jìn)而分析其它藥物的特性。如證明乙酸萘酯能否在非特異性DNA 蛋白質(zhì)的催化下水解,可分別

應(yīng)用酚試劑和三氯化鐵來(lái)檢測(cè)萘酚的存在,變色反應(yīng)靈敏,方法可靠。不僅如此,三氯化鐵還可以作為檢測(cè)DNA 酯酶活性的一種定量方法。

? 利用三氯化鐵對(duì)酯化反應(yīng)的催化作用,也可以給其它如有機(jī)酸和醇的鑒別提供一種有效的分析途徑。

4 注意事項(xiàng):

(1) 由于Fe3 + 的氧化性較強(qiáng),對(duì)一些具有還原性官能團(tuán)的有機(jī)藥物分析時(shí),利用三氯化鐵使配合物顏色形成有所差異,故分析中要控制FeCl3 試液使用的濃度和用量。

(2) 三氯化鐵中Fe3 + 有很強(qiáng)的絡(luò)合能力,能與許多配體形成配合物,因此在進(jìn)行藥物分析時(shí)必須考慮其它成分的干擾。

(3) 利用三氯化鐵氧化性對(duì)藥物進(jìn)行分析, 溶液的酸堿度對(duì)Fe3 + / Fe2 + 電對(duì)電極電位影響較大,必須控制溶液pH值的大小,以使出現(xiàn)產(chǎn)物的顏色與文中所敘相一致。

(4) 由于有機(jī)酸鐵鹽沉淀的穩(wěn)定常數(shù)大小不一,且溶解度普遍相對(duì)較大,因此在利用生成沉淀顏色來(lái)進(jìn)行藥物分析時(shí),要有合適的酸堿度。